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ELISA样本制备指南及注意事项
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定义及介绍
ELISA(enzyme linked immunosorbent assay,酶联免疫吸附测定)是最基础的免疫学实验之一,其理论基础是的特异性反应。ELISA因其特异性强、灵敏度高、稳定性好而被广泛使用。ELISA试剂盒检测样品包括血清、血浆、细胞培养上清、灌洗液或尿液等生物样本,实验操作步骤并不繁琐,但实验完成后需要把样本检测结果OD值转化为浓度值,从而供下一步分析所用,因此样品的预处理对于后续数据处理和结果分析非常重要。
样本制备指南
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血清
全血样品于室温放置2小时或2-8℃过夜后于2-8℃,1000×g离心20min,取上清即可检测。收集血液的试管应为一次性的无内毒素试管。避免使用溶血,高血脂样品
2.血浆
不匹配而出现不能检测的情况。
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对于组织匀浆、组织全蛋白、细胞提取液等蛋白提取样本,经BCA法测定样本蛋白含量后,建议进行蛋白浓度的统一化,避免因组织重量、细胞数、产物体积等因素造成的人为误差;例如,统一全部检测样本浓度为1-2mg/mL,进行后续的稀释和检测。
很多备孕女性都有这样一个困惑,因为多次流产或其他原因,自己的子宫内膜一直达不到标准厚度,所以导致了迟迟不能怀孕。就算做试管婴儿,也要求子宫内膜需要达到8-12mm的厚度,才能进行胚胎移植手术。如果内膜达不到一定的厚度,是非常不利于胚胎着床和发育的。
其实,子宫内膜的厚度也不是一直不变的,通常会随着女性的月经周期而变化,而且还会随着年龄的变化而变化。一般而言,做试管婴儿为了提高胚胎的着床率,胚胎移植前对于女性子宫内膜的要求会高于自然怀孕,为什么会对子宫内膜要求这么高呢?我们先来看一组数据。
不同厚度的内膜,胚胎移植的成功率:
厚度在5-5.9mm之间,临床妊娠率在25.8%,活产率在18.1%;
厚度在6-6.9mm之间,临床妊娠率在33.7%,活产率在24.6%;
厚度在7-7.9mm之间,临床妊娠率在34.6%,活产率在25.5%;
厚度≥8mm时,临床妊娠率在43.2%,活产率在33.7%;
另外,子宫内膜厚度也不能太厚,已有多个研究表明,内膜厚度>15mm时,胚胎移植成功率也会显著降低。
经过大量的案例表明,女性子宫内膜厚度在8-12mm之间,胚胎移植的成功率最高。
很多女性由于各种原因出现内膜过薄或过厚的情况,虽然说内膜低于8mm不一定不能怀孕,但是着床的几率会比较小,可能会出现着床不稳定、流产或者胎停育等现象。所以为了增加成功率,在胚胎移植前调理内膜厚度是很有必要的。有丰富的试管婴儿经验,帮助过很多患者成功怀上宝宝。下面就来分享一下调整子宫内膜的一些方法,让你提高试管婴儿的成功率!
有哪些办法可以改善内膜厚度
如果内膜过厚,做试管婴儿前需要进行诊刮处理;
如果内膜过薄,可以采取以下办法来改善内膜:
1.药物治疗:根据医生的指导,可以通过一些药物来促进内膜生长。不过这些药物针对的病症不同,需要在医生的指导下使用,不可自己私下随便乱用。
2.宫腔灌注:向宫腔内灌注某些药物以达到刺激子宫内膜,增加子宫内膜血流,改善子宫内膜容受性的一种方法。
3.子宫内膜微刺激术:临床研究发现子宫内膜受机械刺激后可促进子宫内膜血管相关因子的表达,诱导其自身修复、改善子宫内膜容受性,从而提高胚胎着床率。子宫内膜微刺激术主要包括子宫内膜活检及刮匙搔刮。
4.内膜贴:内膜贴又称为雌二醇贴片,主要是用来增厚内膜。使用方法比较简单便捷,对身体没有伤害。
总的来讲,做试管婴儿胚胎移植前,是要检查好子宫内膜,如果达不到标准,提前也要调理好的。有更多试管问题记得问哦,出现内膜厚度不达标的情况,应积极配合医生,进行针对性调理。
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